技术文章/ article

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  • 2025-02-14

    在ELISA实验中,标准曲线的问题可能由多种因素引起。以下是一些常见问题及其可能的原因和解决方案:###一、标准曲线不佳1.**不同浓度下的光密度(OD)值不一致**-**原因**:可能由于标准品或样品的稀释不准确、移液误差、洗涤不充分等。-**解决方案**:确保标准品和样品的稀释准确,使用校准过的移液器,并确保洗板机正常工作,酶标板各孔被充分洗涤却不干燥。2.**标准曲线无梯度**-**原因**:样品或标准品污染、错误的稀释、偶联抗体浓度过高、显色时间过长或孵育条件不当等。...

  • 2025-02-06

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被金属硫蛋白(MT)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的金属硫蛋白(MT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转...

  • 2025-01-17

    试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被传染性贫血病毒(CIAV-Ag)抗原的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中滑液囊支原体抗体病毒(MS-Ab)的存在与否。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺...

  • 2024-12-30

    细胞复苏和冻存是细胞培养中常见的操作,主要用于保存和恢复细胞系。以下是一些基本的步骤和注意事项:###细胞冻存(Cryopreservation)1.**细胞准备**:选择生长状态良好的细胞,通过胰蛋白酶或EDTA等消化细胞,使其成为单个细胞悬液。2.**细胞计数**:使用细胞计数器确定细胞密度。3.**加入冻存液**:将细胞悬液与冻存液按一定比例混合,常用的冻存液含有DMSO或丙三醇等作为保护剂。4.**分配细胞**:将细胞悬液分配到冻存管中,通常每管的细胞量是1-2mL。...

  • 2024-12-25

    选择PCR试剂盒的灵敏度时,需要根据实验目的和样本特性来决定。以下是一些关于选择PCR试剂盒灵敏度的建议:1.**实验目的**:-如果实验目的是进行病原体检测,特别是在病原体浓度可能很低的情况下,应选择高灵敏度的试剂盒。-如果实验目的是基因表达分析,并且目标基因的表达水平较高,可以选择中等灵敏度的试剂盒。2.**样本类型**:-对于含有大量抑制物的复杂样本,如血液、尿液等,可能需要更高灵敏度的试剂盒来确保检测的准确性。-对于相对纯净的样本,如细胞培养物或纯化的DNA/RNA,...

  • 2024-12-19

    判断ELISA试剂盒中的试剂是否变质,可以通过以下几种方法进行:1.**外观检查**:-检查试剂是否有颜色变化、沉淀物或异物。-观察试剂瓶是否有裂缝、漏液或瓶盖密封不良的情况。2.**保质期检查**:-检查试剂瓶上的标签,确认是否在有效期内。过期的试剂可能已经变质。3.**性能测试**:-使用标准品或质控品进行测试,比较结果是否与之前的结果一致。-如果标准曲线的形状或吸光度值与之前有显著差异,可能是试剂变质。4.**存储条件检查**:-确认试剂是否按照推荐的存储条件(如温度、...

  • 2024-12-09

    ELISA(酶联免疫吸附试验)试剂盒是一种常用于检测特定抗原或抗体的实验室工具。关于ELISA试剂盒产品有效成分含量的特点,以下是一些关键点:1.**高特异性**:ELISA试剂盒中的有效成分,如抗原或抗体,通常具有非常高的特异性,这意味着它们能非常精确地识别并结合目标分子,而不会与其他分子发生交叉反应。2.**标准化**:ELISA试剂盒中的有效成分含量是经过严格标准化的。制造商通常会提供已知浓度的标准品,以确保检测结果的准确性和重复性。3.**稳定性**:有效成分通常在特...

  • 2024-12-06

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被氢化酶(HYS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的氢化酶(HYS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品活性。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心...

  • 2024-12-04

    ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种用于检测和定量特定抗原或抗体的免疫分析技术。为了避免交叉污染,可以采取以下措施:1.**分区操作**:-将实验分为加样区、反应区、洗板区和读板区,各区域使用不同的器材,避免交叉使用。2.**使用一次性耗材**:-使用一次性的吸头、手套和包被板,用后即弃,避免重复使用。3.**清洗和消毒**:-定期清洁实验室工作台面,使用70%乙醇或其他消毒剂进行消毒。-洗板机在使用前后都要进行清洁和消毒。4.**正确的操作技术**:-加样时避免液体飞溅,不...

  • 2024-11-28

    Elisa试剂盒洗涤液的选择对于实验结果的准确性至关重要。以下是一些选择洗涤液时应当考虑的因素:1.**离子强度**:洗涤液通常含有一定浓度的盐,如氯化钠或磷酸盐,以维持适宜的离子强度,这有助于减少非特异性吸附。2.**pH值**:洗涤液的pH值应该与Elisa实验中的其他步骤相匹配,通常接近中性或略偏碱性,以确保不影响抗体与固相载体的结合。3.**洗涤剂**:洗涤液中通常会加入洗涤剂,如吐温20(TWEEN20)或吐温80,以及非离子洗涤剂如TritonX-100。这些洗涤...

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