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人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒
elisa检测试剂盒不需要任何分离步骤,操作十分简便、快速,数分钟便能得出结果,酶免疫测定方法操作时,所有反应试剂均在同一体系内进行,自主研发和销售多年,对ELISA试剂盒这方面的研究越来越专业,小至成本,大至数据,帮助许多科研人士完成实验。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-02-21
  • 访  问  量:1581
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产品详情
品牌其他品牌货号RQ-FW0354A
规格96T/48T供货周期现货
主要用途科研试验品牌瑞清
方法竞争法、夹心法、间接法检测样本血清.血浆.组织.相关液体等
检测种属人,小鼠,大鼠,植物,鱼,虾,蟹,牛,羊,狗,猫,微生物,细胞,土壤等动植物产品优势灵敏性高特异性强

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒



检测原理

试剂盒采用双抗原一-步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被病毒性腹泻病毒ti的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在suan的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度(OD) ,与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猪病毒性腹泻病毒(BVDV) 的存在与否。

样品收集、处理及保存方法

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆: EDTA、柠檬suan盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液: 3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转 离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按次用量分装,冻存于-20°C, 避免反

复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


自备物品

1.酶标仪(450NM)

2.高精度加样器及枪头: 0.5-10UL2-20UL20-200UL200-1000UL

3.37恒温箱

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8°C,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完quan溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.预处理后的样本请按照操作步骤用样ben稀释ye适当稀释以达到试剂盒的的jia检测效果。.

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

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人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒

常用方法:

1. 夹心法:

夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为:

a. 将具有专一性的ti固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余ti

b. 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结

c. 洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次ti,与待测抗原进行键结

d. 洗去多余未键结一次ti,加入带有酶的二次ti,与一次ti键结

e. 洗去多余未键结二次ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果

原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆ti分别作为固相ti和酶标ti,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2. 间接法

间接法常用于检测ti,一般的操作步骤为:

a. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待测检体,检体中若含有待测的一次ti,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

c. 洗去多余待测检体,加入带有酶的二次ti,与待测的一次ti键结。

d. 洗去多余未键结二次ti,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测ti的含量。

原理:利用酶标记的抗ti以检测已与固相结合的受检ti


3. 竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,其操作步骤为:

a. 将具有专一性的ti固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余ti

b. 加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结

c. 加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的ti进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的ti数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著ti就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上ti键结,即所谓竞争法之由来。

d. 洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。

e. 当需要侦测无法获得两种以上单一性ti的抗原,或是不易得到足够的纯化ti以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法ELISA

标本要求 :

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控

制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于

标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍) 后再测定,计算时请

后乘以总稀释倍数(xnx5)

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

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