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按这个步骤操作植物ELISA试剂盒,既简单又安全

更新时间:2023-05-08      浏览次数:262

植物elisa试剂盒检测中除了包被外,一般需进行45加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性,例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出现气泡。

 

  样本处理:

  1、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

  2、血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

  3、细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

  5、保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

  

  植物elisa试剂盒检测的操作步骤:

  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃

  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

  3、样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加;

  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次;

  6、每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

  7、每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 


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