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ELISA试剂盒实验灵敏度高的原因

更新时间:2023-04-23      浏览次数:287

ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。

 

ELISA试剂盒试验操作中可能影响结果的原因及解决办法分析:

 

1 选择试剂

 

选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

 

2 加样可能原因:

 

1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;

 

2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)

 

3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。

 

ELISA试剂盒解决办法:

 

1) 标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。

 

2) 加样后及时放入孵箱。

 

3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

 

4) 如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

 

5) 标本较多时,请分批操作。

 

3 孵育可能原因:

 

1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗che底;

 

2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗che底。



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